Тестирование мужского бесплодия

Тестирование мужского бесплодия

Тестирование мужского бесплодия

Самым простым и распространенным способом тестирования фертильности мужчины является рутинный анализ семенной жидкости.
Мужчину, как правило, просят воздержаться от эякуляции в течение, как минимум, 2-х или максимум 5-ти дней, прежде чем он предоставит образец спермы для оценки. Образец обычно собирают в специальный стерильный контейнер в клинике и немедленно доставляют в лабораторию андрологии, где он тестируется.

Макроскопическое исследование

Хотя наиболее важными параметрами являются количество, подвижность и морфология сперматозоидов, другие факторы эякулята, включая прогрессию, объем, консистенцию (вязкость) и реакцию агглютинации, также имеют значение. Согласно последним критериям всемирной организации здравоохранения(ВОЗ) нормальный образец спермы должен иметь 1,5 мл объема (и не более 5 мл), 15 миллионов сперматозоидов на 1 мл эякулята, 32% прогрессивной моторики и 4% морфологически нормальных сперматозоидов.

Образец должен разжижиться в течение максимум 15 минут (хотя критерии ВОЗ позволяют в течение 60 минут) после эякуляции. Специфические ферменты (поступающие из предстательной железы) активируются сразу после семяизвержения с целью разжижения спермы. Иногда семенная жидкость может не полностью разжижиться или остаться в виде слизистых прожилок, содержащих желеобразные вкрапления. Это может свидетельствовать о функциональных нарушениях простаты или инфекциях, таких как простатит (возможно, хронический). Гомогенный опалесцирующий внешний вид также может быть нарушен присутствием коричневатого цвета, предполагающим накопление крови в эякуляте, которое может иметь клиническое значение.

Величина pH образца спермы, которая определяет её кислотность (если эта величина ниже 7) или щелочность (выше 7) должна находиться в диапазоне 7.2-8.0. Если значение pH превышает 8.0 (повышенная щелочность), должна быть заподозрена инфекция на основании снижения секреции простатой кислотных побочных продуктов, в то время как если эта цифра меньше, чем 6.8 (повышенная кислотность) следует рассмотреть агенезию семенных пузырьков (желез, секретирующих значительную часть жидкости, которая в конечном счете становится спермой).

Это исследование включает в себя оценку подвижности, прогрессии, концентрации и морфологии сперматозоидов, в то же время изучаются присутствие популяции других клеток, реакция агглютинации между сперматозоидами и отходы продуктов распада.

Обычная оценка прогрессивной подвижности и морфологии влечет за собой осмотр небольшого объема (8-12 мл) спермы под световым микроскопом при увеличении X200-X600 и при комнатной температуре (23°C).

По крайней мере 100 сперматозоидов оцениваются в пределах одного или более полей микроскопа, и подвижность оценивается от 1 до 4 на основании следующих критериев:

  • Быстрая линейная прогрессивная подвижность (преодоление расстояния по меньшей мере 20 мкм или половину длины сперматозоида в секунду)
  • Медленная или вялая прогрессивная подвижность.
  • Непрогрессивная подвижность
  • Неподвижность

Зрелый сперматозоид делится на три основные части: голова, шея и хвост.

Морфологически ненормальным считается сперматозоид, имеющий дефект овальной формы головы и/или компактной спиралевидной формы шеи и/или хвоста в виде жгутика. Дефект головной части сперматозоида может иметь место из-за отклонения от нормы в размере или в форме головы (слишком крупная, мелкая, аморфная, удлиненная, двойная, круглая и т.д.).
Дефект шеи или средней части может быть связан с отсутствием хвоста, согнутым хвостом или хвостом неправильной формы, увеличенным или уменьшенным размером шеи.
Дефекты хвостовой части сперматозоида могут включать в себя скрученные, сломанные, разветвленные или необычной ширины хвосты.

Good Quality Sperm



Poor Quality Sperm

Концентрация сперматозоидов в семенной жидкости является хорошим показателем мужской фертильности, и в то время как количество спермы в 30 миллионов признается нормальным, длительность воздержания и объем эякулята следует учитывать для правильной оценки. Анализ плотности спермы традиционно проводится с использованием специального счетчика клеток, а именно гемоцитометра.
Доказательства иммунологического фактора бесплодия могут быть получены после микроскопического наблюдения спермы на реакцию агглютинации. Сперматозоиды чаще всего прилипают друг к другу головой к голове, головой к хвосту или хвостом к хвосту.

MAP-тест с антителами класса IgA и IgG проводят путем смешивания образца нативного эякулята с частичками латекса или с эритроцитами, покрытыми человеческими антителами класса IgA или IgG. К этой смеси добавляют моноспецифическую античеловеческую IgG-антисыворотку. Образование смешанных аглютинатов показывает, что сперматозоиды покрыты IgA или IgG . Диагноз «иммунологическое бесплодие» правомочен, если частички прикреплены не менее чем к 50% подвижных сперматозоидов.

Азооспермия

Азооспермия — это состояние, при котором после концентрации семенной плазмы сперматозоиды не идентифицируются с помощью мощного микроскопа.
Это касается приблизительно 1% мужского населения и составляет до 15% от всех мужских факторов бесплодия. Азооспермия отличается от аспермии, которая является полным отсутствием семенной жидкости в эякулянте.

Есть три отдельные категории азооспермии:
I. Претестикулярная, которая ассоциируется с эндокринными нарушениями.
II. Тестикулярная, где дисфункция присуща самим семенникам (первичная тестикулярная недостаточность).
III. Посттестикулярная, когда эякуляторная и протоковая дисфункция предотвращают попадание спермы в уретру.

В то время как 1е и 3е условия излечимы, тестикулярные причины азооспермии некорректируемы (за исключением варикоцеле). Субоптимальный результат или азооспермия диагностируются в результате рутинного анализа семенной жидкости, а также нескольких аттестационных испытаний, которые входят в три основных категории:

1. История болезни (детские болезни или расстройства, воздействие токсинов, таких как радиация или химиотерапия, генитальные травмы или хирургические вмешательства, инфекционные заболевания, прием лекарств в настоящем и прошлом, семейная история).

2. Медицинский осмотр (размер и внешний вид семенников, наличие травм или шрамов на паховых участках или мошонке, вторичные половые характеристики, такие как гинекомастия, оволосение и телосложение пациента, наличие и консистенция семявыносящих протоков и придатков, наличие варикоцеле).

3. Эндокринная оценка (гормональный профиль — ФСГ, ЛГ, общая концентрация тестостерона).

Фрагментация ДНК сперматозоидов (DSF)

Фрагментация ДНК сперматозоидов — это состояние, при котором генетическая целостность сперматозоидов нарушена. В то время как оплодотворение яйцеклетки возможно, нормальное развитие эмбриона находится под серьёзной угрозой, что может привести к скорой остановке его роста.

Чем выше процент фрагментации ДНК спермограммы, тем ниже шансы на здоровую беременность. Побочные эффекты этого состояния могут быть смягчены при оплодотворении яйцеклеток молодых женщин, поскольку они имеют более высокий потенциал для запуска защитных механизмов, чем ооциты более взрослых женщин. Следовательно, чем моложе женщина, тем лучше прогнозы.

В то время как самой распространенной причиной фрагментации ДНК сперматозоидов является оксидативный стресс, совокупность других факторов, таких как деятельность топоизомеразы и апоптоз могут спровоцировать заболевание. Воздействие экологических и профессиональных загрязнителей, образ жизни (то есть диеты, курение сигарет и потребление наркотиков), инфекции, повышение температуры яичек(варикоцеле) и преклонный возраст (обычно старше 45 лет) также являются возможными причинами.

DNA Sperm Fragmentation Assessment

Antisperm Antibodies
Эффективное лечение фрагментации ДНК сперматозоидов трудно, если вообще возможно, в то время как изменения в образе жизни и применение антиоксидантов, таких как селен, рыбий жир и витамин C могут иметь положительный эффект, направленный на снижение оксидативного стресса.

Лечение антибиотиками инфекции, которая спровоцировала фрагментацию ДНК сперматозоидов или варикоцеле может иметь некоторый положительный результат. Существуют доказательства того, что повреждение целостности ДНК происходит на посттестикулярном уровне. Сперма, извлеченная из яичек для ICSI хирургическим путем имеет лучшие показатели по сравнению со сперматозоидами, традиционно извлеченными из эякулята.
Стандартным подходом к скринингу фрагментации ДНК сперматозоидов является Halosperm тест, основанный на исследовании хроматина сперматозоидов. Если коротко, сперматозоид, имеющий большой ореол («ХАЛО») — это сперматозоид без ДНК фрагментации. Сперматозоид без «ХАЛО» или с маленьким ореолом — это сперматозоид с фрагментированной ДНК.

Анеуплоидия спермы

Анеуплоидия — это генетическое нарушение, при котором число хромосом в ядре клетки не соответствует должному количеству. Дополнительные или отсутствующие хромосомы являются частой причиной генетических нарушений, в том числе врождённых пороков развития человека. Все клетки нашего организма, известные как соматические, имеют 46 хромосомов, кроме половых клеток (яйцеклетки и сперматозоиды), которые имеют 23 хромосома.

В то время как хромосомные аномалии в соматических клетках легко могут быть подвергнуты скринингу с помощью анализа крови на кариотип, исследования хромосомов в сперматозоидах требует использования специальных методов. Приблизительно 10% всех сперматозоидов у мужчин с нормальной фертильностью имеют генетическую аномалию, в то время как этот показатель дополнительно увеличивается у мужчин с низким качеством спермы. Морфологически нормальный сперматозоид также может иметь анеуплоидию, хотя более высокая распространенность этого заболевания наблюдается в сперматозоидах с аномальной морфологией. Оплодотворение яйцеклетки анеуплоидным сперматозоидом приводит к раннему эмбриональному аресту или выкидышу, или реже, к рождению ребенка с генетическими болезнями. К сожалению, сегодня не существует эффективного лечения анеуплоидии. Считается, что здоровый образ жизни может быть полезен, также как употребление фолиевой кислоты. Анеуплоидия сперматозоидов, кроме преклонного возраста, может быть следствием воздействия токсинов (радиации, химиотерапии, экологических и профессиональных загрязнителей), чрезмерного курения сигарет и употребления алкоголя и кофеина. Людям с плохой морфологией и низким количеством сперматозоидов, с отклонениями в гормональном профиле, с неоднократными неудачными попытками ЭКО или повторными выкидышами рекомендуется пройти тест на анеуплоидию сперматозоидов.

Техника, именуемая FISH, позволяет исследовать хромосомы в сперматозоидах с помощью флюоресцентных зондов и определить, является ли хромосомный набор сперматозоида нормальным. Ограничением метода является то, что только несколько хромосом могут быть подвергнуты скринингу (13, 18, 21, X и Y). Нормальный сперматозоид характеризуется появлением одного флюорисцентного сигнала в ядре для каждого из меченых хромосомов.